目前有太多的公司开始布局流式荧光免疫试剂的开发，不管是初创公司出于融资也好，还是老牌企业谋求新的出路也罢，总之看起来都跃跃欲试。那这是不是一个值得开拓的方向呢？接下来就以问答的形式来探讨一下目前流式荧光试剂的一些开发和应用问题。
A 流式荧光相对于化学发光有什么优势吗？
流(liu)式(shi)荧光(guang)最(zui)核心的(de)卖点就是(shi)单(dan)孔(kong)多(duo)联检。同(tong)样都是(shi)10-50uL的(de)血(xue)清(qing)，化学(xue)发(fa)光(guang)只可以出单(dan)项(xiang)结果，流(liu)式(shi)荧光(guang)可以出几(ji)十项(xiang)结果。从所出结果的(de)准(zhun)确(que)度(du)方面考虑，流(liu)式(shi)荧光(guang)与化学(xue)发(fa)光(guang)几(ji)乎没有(you)什么差(cha)别，而且(qie)理论上如(ru)果磁珠清(qing)洗(xi)液对(dui)于(yu)PE的(de)保存十分有(you)利，流(liu)式(shi)荧光(guang)的(de)稳定性甚至是(shi)优于(yu)酶促发(fa)光(guang)的(de)，也(ye)就是(shi)长时间的(de)放置(zhi)也(ye)不会影响(xiang)最(zui)终的(de)读数(shu)。
B 单孔(kong)多联检的实现(xian)会给流(liu)式荧光(guang)省(sheng)去很(hen)多的反应(ying)时间吗(ma)？ 因(yin)为流(liu)(liu)式(shi)(shi)(shi)荧(ying)光(guang)(guang)(guang)和(he)化(hua)学发光(guang)(guang)(guang)的(de)(de)反(fan)应过(guo)程(cheng)(cheng)几(ji)乎是(shi)(shi)(shi)一(yi)(yi)致(zhi)的(de)(de)，谈到(dao)节(jie)省(sheng)(sheng)时(shi)间(jian)(jian)，应该不(bu)(bu)(bu)会有太大的(de)(de)优(you)(you)势。我举个(ge)(ge)(ge)例子，比如(ru)我们做的(de)(de)项目是(shi)(shi)(shi)抗(kang)核(he)抗(kang)体16项，假(jia)如(ru)发光(guang)(guang)(guang)和(he)流(liu)(liu)式(shi)(shi)(shi)荧(ying)光(guang)(guang)(guang)的(de)(de)反(fan)应过(guo)程(cheng)(cheng)耗时(shi)一(yi)(yi)样(yang)，最(zui)终读(du)数(shu)的(de)(de)时(shi)候，发光(guang)(guang)(guang)是(shi)(shi)(shi)每隔10s读(du)取一(yi)(yi)个(ge)(ge)(ge)结果(guo)，单(dan)样(yang)本需(xu)要耗时(shi)160s；流(liu)(liu)式(shi)(shi)(shi)是(shi)(shi)(shi)1min读(du)取16个(ge)(ge)(ge)结果(guo)，也(ye)就是(shi)(shi)(shi)60s；看(kan)(kan)起(qi)来(lai)每个(ge)(ge)(ge)样(yang)本流(liu)(liu)式(shi)(shi)(shi)会节(jie)省(sheng)(sheng)100s，但是(shi)(shi)(shi)这通常构不(bu)(bu)(bu)成绝(jue)对的(de)(de)优(you)(you)势，况且(qie)发光(guang)(guang)(guang)试(shi)剂的(de)(de)反(fan)应时(shi)长通常都是(shi)(shi)(shi)短于流(liu)(liu)式(shi)(shi)(shi)的(de)(de)。比如(ru)再举个(ge)(ge)(ge)例子，细胞因(yin)子12项，我知道像是(shi)(shi)(shi)IL-6这种，罗氏的(de)(de)第一(yi)(yi)个(ge)(ge)(ge)样(yang)本报(bao)告时(shi)间(jian)(jian)最(zui)快可以(yi)是(shi)(shi)(shi)20多分钟，而(er)大多数(shu)流(liu)(liu)式(shi)(shi)(shi)的(de)(de)反(fan)应时(shi)间(jian)(jian)就已经达到(dao)了(le)1-2个(ge)(ge)(ge)小(xiao)时(shi)，所(suo)以(yi)从结果(guo)的(de)(de)报(bao)告时(shi)长来(lai)看(kan)(kan)，流(liu)(liu)式(shi)(shi)(shi)却又并(bing)不(bu)(bu)(bu)占优(you)(you)势了(le)。与(yu)其(qi)说是(shi)(shi)(shi)流(liu)(liu)式(shi)(shi)(shi)节(jie)省(sheng)(sheng)时(shi)间(jian)(jian)，倒(dao)不(bu)(bu)(bu)如(ru)说流(liu)(liu)式(shi)(shi)(shi)节(jie)省(sheng)(sheng)的(de)(de)是(shi)(shi)(shi)样(yang)本和(he)试(shi)剂仓的(de)(de)孔位，让整个(ge)(ge)(ge)反(fan)应节(jie)省(sheng)(sheng)了(le)仪器很多的(de)(de)空间(jian)(jian)，流(liu)(liu)程(cheng)(cheng)也(ye)更(geng)加简化(hua)。
C 流(liu)式试剂(ji)相比于(yu)发光试剂(ji)，会(hui)节省成本吗？
这(zhei)个(ge)答(da)案(an)是肯(ken)定(ding)的(de)。首(shou)先就(jiu)是耗材的(de)成(cheng)本，单(dan)孔(kong)位(wei)可以(yi)完成(cheng)多(duo)孔(kong)位(wei)的(de)工(gong)作，反(fan)应杯和工(gong)作液都可以(yi)省出(chu)很多(duo)。尤(you)其(qi)是抗(kang)(kang)原(yuan)抗(kang)(kang)体(ti)(ti)的(de)应用量，我(wo)举个(ge)例子。比如对于发光，1mg磁珠(zhu)按(an)照(zhao)50ug的(de)蛋(dan)(dan)白(bai)标(biao)记量，最终(zhong)做成(cheng)10mL的(de)工(gong)作液，如果按(an)照(zhao)50uL每(mei)人份(fen)的(de)话，那么50ug蛋(dan)(dan)白(bai)可以(yi)做成(cheng)200人份(fen)；对于流式，50ug蛋(dan)(dan)白(bai)可以(yi)标(biao)记10^7个(ge)磁珠(zhu)，而这(zhei)些磁珠(zhu)可以(yi)做20000人份(fen)试剂！200vs20000，你可以(yi)体(ti)(ti)会到(dao)1mg蛋(dan)(dan)白(bai)用到(dao)天荒地老的(de)乐趣了。
D 传统的发光(guang)厂(chang)家可以(yi)直接(jie)跨越到流式荧光(guang)吗？ 没问题。对于全自动流式荧光免疫分析仪，和磁微粒发光仪器相比，可以说除了检测模块，没有任何的区别。只要把最常用的2激光8通道的检测模块安装到自己原有的发光仪器里面，就可以完全适用。而且，如果你是做发光比较成熟的企业，还可以做成流式和发光全自动一体机，这也是目前全自动仪器的进一步拓展，原有发光产品的应用不受限制。比如目前东方生物的产品Mplex-MA1600就是如此。但是，这样一来仪器成本会相应增加，这也是企业需要考虑的因素。对于试剂研发而言，发光和流式也不会有什么差别，几乎可以做到无缝衔接，唯一的区别就是磁珠。
E 编码磁珠的成本高(gao)吗？可不可以(yi)自(zi)己制(zhi)备？有(you)技术壁垒吗？
目前(qian)做(zuo)编码磁珠的(de)厂(chang)家(jia)是越来越多了，要相信上游(you)原料厂(chang)家(jia)的(de)嗅觉(jue)是非常灵敏的(de)。像是为(wei)度(du)、碧芯、纳微(wei)(wei)、新(xin)纵科等等都(dou)在忙着新(xin)微(wei)(wei)球的(de)制备(bei)。从(cong)各(ge)个厂(chang)家(jia)的(de)研发进(jin)度(du)来看，编码磁珠的(de)研发并不是一件难事(shi)，因此企业花点成本(ben)去搞微(wei)(wei)球的(de)研发也(ye)是值得(de)的(de)，因为(wei)采购别人的(de)微(wei)(wei)球目前(qian)来看成本(ben)还是略高的(de)。
F 企业引进流(liu)式，哪(na)些项(xiang)目是必(bi)(bi)须要(yao)做的？真的有这个必(bi)(bi)要(yao)吗？
流式(shi)平台(tai)(tai)的(de)引入(ru)，很(hen)有(you)(you)必要做的(de)项(xiang)目(mu)有(you)(you)细胞因子、自身免疫项(xiang)目(mu)、过敏原检(jian)测项(xiang)目(mu)、肿(zhong)瘤筛(shai)选(xuan)、传(chuan)染病联检(jian)项(xiang)目(mu)、心肌联检(jian)项(xiang)目(mu)、肝(gan)纤(xian)项(xiang)目(mu)等(deng)…其(qi)实完(wan)全可参考透景这个(ge)老大哥的(de)企业动态(tai)，毕竟他们(men)家引入(ru)流式(shi)平台(tai)(tai)是国(guo)内很(hen)早的(de)。但是反过来我们(men)看(kan)一(yi)下透景的(de)流式(shi)平台(tai)(tai)的(de)发展，好像并不是特别尽如人(ren)意。
像是细胞(bao)因子检(jian)测，临床意义都(dou)没有(you)特别明确；自身(shen)免疫(yi)检(jian)测，欧蒙的客户教育无人能敌；过(guo)敏原检(jian)测，帝迈目前(qian)拿(na)证一段(duan)时(shi)间了却还没有(you)发力(li)；传染病项目，Elisa的地位基本上(shang)很难撼动；心(xin)肌联合检(jian)测，肝纤四项，发光(guang)甚至荧光(guang)POCT都(dou)够用(yong)了…
另(ling)外就是几十项联合(he)检测的医院收费问题也是关(guan)键，如果(guo)项目太少，发光就够用；项目太多(duo)，又涉嫌捆绑销售(shou)。所以整体来看(kan)，流式(shi)企业如何规划自己的产(chan)品组合(he)以迎合(he)市场需求，可能会让市场部的人(ren)费点心思。
G 目前拿证(zheng)的全自动流式荧光(guang)分析(xi)仪多吗？竞争力怎么样？
以(yi)下是(shi)(shi)药监局目前拿证的几家全自动流(liu)式(shi)荧光发光免(mian)疫分析(xi)仪(yi)，目前来看做的企业并不(bu)是(shi)(shi)很多，如(ru)果(guo)定位要做，现在起步还并不(bu)晚。本人大致浏览了一下各(ge)个厂家的仪(yi)器(qi)，算是(shi)(shi)中(zhong)规(gui)中(zhong)矩吧，令人惊艳的目前还没(mei)有，所以(yi)肯定还需要后来革命者。
最后总结一下：
1.相较于发光而(er)言，目(mu)前流式(shi)荧光除了原材料方面(mian)比较节省(sheng)，在(zai)仪(yi)器成本、检测时间方面(mian)还没(mei)显(xian)现出非常凸出的优势；
2.目(mu)前的流(liu)式全自(zi)动仪器(qi)并无技惊(jing)四座的地(di)方，从化学发(fa)光到流(liu)式也基本上(shang)没(mei)有技术壁(bi)垒(lei)，唯一有技术含量的就是编(bian)码(ma)磁珠的开发(fa)，但随着磁珠制备厂商的遍地(di)开花，自(zi)己开发(fa)似乎也没(mei)那么必要；
3.为了迎合流式平(ping)台的(de)(de)特(te)点，像是(shi)细胞因子(zi)，自身免疫等很多(duo)公司(si)之前没有涉(she)及的(de)(de)项目就得重新立(li)项和注册，但(dan)是(shi)这些产品真正做(zuo)的(de)(de)意义有多(duo)大，做(zuo)出来市场竞(jing)争(zheng)力(li)如何(he)，好像无从考量(liang)，只(zhi)是(shi)单纯地为了建设(she)这个平(ping)台而(er)新增的(de)(de)工(gong)作；
4.想比于免疫(yi)印迹，基于编(bian)码磁珠的(de)(de)流式荧光(guang)平台确实给了(le)多(duo)联(lian)检定量(liang)更多(duo)的(de)(de)可能(neng)性(xing)，但是(shi)这些项目的(de)(de)样本含量(liang)和(he)交叉反应性(xing)却(que)都限制了(le)流式平台的(de)(de)组合应用，比如CRP和(he)SAA可以(yi)联(lian)检，CRP(0.5-200ug/ml)和(he)PCT(0.1-100ng/ml)联(lian)检就(jiu)显得(de)有些困难，线性(xing)区间差(cha)别太(tai)大。
5.目(mu)前流式(shi)平(ping)台各个(ge)厂家都属(shu)于刚起步阶段(duan)，如果企业规(gui)划里目(mu)标很明(ming)确就是(shi)要搞(gao)自免项目(mu)，那么(me)目(mu)前搞(gao)一(yi)搞(gao)这(zhei)个(ge)平(ping)台相(xiang)对(dui)来(lai)说还是(shi)比较有竞争力(li)的(de)，毕竟市场(chang)还未被挖掘的(de)太厉(li)害(hai)。但布局肯定(ding)是(shi)越快(kuai)越好，比如帝迈的(de)过敏原检测，目(mu)前基(ji)于流式(shi)平(ping)台有证的(de)仅此一(yi)家，虽然捡了湖(hu)南省(sheng)药监局免临(lin)床(chuang)的(de)一(yi)波(bo)福(fu)利，但是(shi)人(ren)家捡的(de)恰到好处也是(shi)一(yi)种能力(li)。目(mu)前虽然帝迈还没(mei)有发(fa)力(li)，只能说他们比较低调，还在认真打磨这(zhei)个(ge)产品。一(yi)旦开始发(fa)力(li)，抓(zhua)住市场(chang)，后(hou)来(lai)者将非(fei)常被动。因(yin)为(wei)临(lin)床(chuang)费用就卡住了很多人(ren)的(de)脖子，更别说后(hou)续的(de)市场(chang)开拓了。
总(zong)而言之，要(yao)么(me)就别(bie)做(zuo)，做(zuo)就要(yao)稳准狠，只要(yao)落下一(yi)步，就会被(bei)市场抛弃。
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